液相色谱仪柱压过高应该如何解决？

柱压过高是液相色谱在使用过程中较常出现的问题，指的是压力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时，我们应该分段进行检查。

1、先断开真空泵的入口处，此时PEEK管里充满液体，使PEEK管低于溶剂瓶，看液体是否自由滴下，如果液体不滴或缓慢滴下，则是溶剂过滤头堵塞。

处理方法：用30%的硝酸浸泡半个小时，在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下，溶剂过滤头正常，再检查;

2、打开Purge阀，使流动相不经过柱子，如果压力没有明显下降，则是过滤白头堵塞。

处理方法：将过滤白头取出，用10%的异丙醇超声半个小时。如果压力降至100 PSI(6.7 Bar)以下，过滤白头正常，再检查;

3、把色谱柱出口端取下，如果压力不下降，则是柱子堵塞。

处理方法：如果是缓冲盐堵塞，则用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞，则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降，则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上，用流动相冲洗柱子。这时，如果柱压仍不下降，只有换柱子入口筛板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以尽量少用。

液相色谱仪日常的维护与保养：

1、储备液（流动相） 首先要使用HPLC级的溶剂和试剂，同时要保持流动相储存液的清洁，特别是储液器内的过滤头要定期清洗，必要时进行更换。在使用含有缓冲盐的流动相后一定要时进行相应比例的水和有机溶剂进行充分的冲洗。正反相流动相相互交换时要用互溶的中性溶剂进行中介替换。另外：流动相不可长期储存，要用多少配多少以防生长微生物和组分改变。

2、泵 泵内的密封圈、单向阀、柱塞杆及在线过滤器都是易磨损的部件，特别是密封圈的损坏可引起系统的许多故障。所以有人建议定期更换但也不能一概而论，要看垫圈的材料质量，使用压力的大小以及缓冲液用后的处理情况而定。

3、进样系统 对进样器首先注意严禁用尖针头的针进样，以防划坏转子密封垫。另处使用后要充分清洗进样器，将进样器内沉积的样品以及无机盐清洗干净。对自动进样器要定期对针定量环和进样密封垫进行清洁，更换以保证进样量的准确一致。

4、色谱柱 在色谱柱的使用中要注意：①轻拿轻放以防破坏柱内固定相的粒子。②在柱前安装预柱，防止柱污染，延长色谱柱的使用寿命。③最大限压不要设的太高，防止柱压力过高冲击过大。④使用的溶剂要符合色谱柱使用的各种要求。

5、检测器 首先要保证检测池的清洁，不仅每天用后要对检测器进行充分的冲洗，而且还要定期的用强溶剂反向冲洗检测池。另外，检测器用的灯是有一定寿命的，在清洗泵等其它不用检测器时可将检测器关上。使用脱过气的流动相，防止池内进入气泡。