液相色谱仪流动相的配制与使用

液相色谱仪是利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。对高沸点、难气化化合物的混合物通过色谱柱和淋洗剂实现分离。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、分离效率高、色谱柱可反复利用，流出组分易收集等优点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析、石油化工等各种领域。

LC210液相色谱仪

1、恒度洗脱

　　一定是将水相与有机相混合后、抽滤（使用混合型过滤膜），用一个管路（如A管）泵入仪器，这是使用的原则。切勿因节约有机相、便于摸索色谱条件等原因而使用两个管路(一个纯水相、一个纯有机相)泵入仪器，即便配制了脱气机，因为这样极易造成水相中盐和表面活性剂的少量析出。

　　剩余流动相完全可继续使用，密封后放置阴凉处，待下次试验时与新配制的流动相混合后抽滤即可。无需担心发霉、无机盐析出、挥发、比例不准等问题。

2、梯度洗脱

　　流动相配制最为科学的方式是：A相为高比例的水相-低比例的有机相、B相为低比例的水相-高比例的有机相。其次为：A相为高比例的水相-低比例的有机相、B相为纯有机相。最不科学的为：A相为纯水相、B相为纯有机相，如既有质量标准采用了此种方式，建议改为第二种或第一种方式，否则基线漂移严重，难以进行稳定的杂质检测。

梯度洗脱结束后，建议经5分钟回到初始状态，再平衡5分钟后开始下一针测定。注意这10分钟的稳定极为关键。切勿短时间内回到初始状态，会对仪器和色谱柱损伤较大。

3、水相中的溶质溶解方式

　　水相中需溶解的无机盐和表面活性剂等固体溶质，建议采用加热法，不建议采用振摇、超声等方式。不当方式的溶解，溶质可能处于“临界胶团浓度”，其后一旦遇到某特殊情形(如遇有机溶剂、温度剧降等)，极易析出少量结晶。而一旦析出，便将损伤仪器和色谱柱，呈现泵头处析出“盐和白粉”的现象。

4、注意事项

如需使用正相系统，一定要单独采用一台仪器(如二手的或较为破旧的)，切勿采用异丙醇转换，此举对仪器损伤极大。

正相所使用的流动相(如正己烷、环己烷等)，无需抽滤，混匀超声后即可使用。