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各种常见缓冲液的配制方法

点击: 次 时间:2019-06-13 12:01


    磷酸盐缓冲液,Tris缓冲液和柠檬酸缓冲液等是生物学实验中常用的缓冲液。然而,这些缓冲液的配制比较麻烦,尤其当要获得特定pH值的缓冲液时,调节pH值是费力、费时的事情。对于Tris等缓冲液等,pH计是无法准确测量其pH值的。
    那么,有没有简便的方法来配制特定浓度和pH值的上述缓冲液呢?
1)配制磷酸盐缓冲液:由一定量的Na2HPO4和NaH2PO4混合而得。
2)配制柠檬酸(盐)缓冲液:由Citric Acid(柠檬酸)和Trisodium Citrate(柠檬酸钠)混合而得。
3)配制醋酸溶液:在水中加入一定体积的醋酸而得。
4)配制Tris缓冲液:由一定量的Tris HCl(Tris酸)和Tris Base(Tris碱)混合而得。
5)重量与摩尔数转换工具:已知一蛋白的分子量(kDa),可由重量推算出摩尔数和分子数,以及在一定体积内摩尔浓度。相反,也可由一个蛋白的摩尔数推算出重量和分子数,以及由摩尔浓度推算出所含的蛋白质量。
 

    附:这些缓冲液在溶解重组细胞因子和蛋白中的应用举例:
1)磷酸盐缓冲液:1xPBS用于溶解100-19Human KGF 和100-52Human FGF-23等。
2)柠檬酸(盐)缓冲液:5mM柠檬酸钠(pH8.0)用于溶解100-17A Human FGF-acidic, 10mM柠檬酸(pH3.0)用于溶解100-21 Human TGF-b1等。
3)醋酸溶液:10mM醋酸用于溶解120-10 Human Noggin和120-20 Human WISP-3等。
4)Tris缓冲液:5mM Tris(pH7.6)用于溶解100-18B Human FGF-basic,10mM Tri(pH8.0)用于溶解100-25 Human FGF-8。



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