饲料中喹乙醇的测定方案

概述

据央视315晚会曝光，有的养殖户和厂家将的黄色粉末状药物（喹乙醇）喂食给了动物。喹乙醇长期使用，会蓄积在动物体内，诱变细胞染色体畸形，此外还会造成耐药性，给人类身体健康带来潜在危害。

喹乙醇又称喹酰胺醇，由于喹乙醇有中度至明显的蓄积毒性，对大多数动物有明显的致畸作用，对人也有潜在的三致性，即致畸形，致突变，致癌。

因此喹乙醇在美国和欧盟都被禁止用作饲料添加剂。《中国兽药典》(2005版)也有明确规定，喹乙醇被禁止用于家禽及水产养殖。

本文主要介绍某饲料中喹乙醇的测定。

一、参考标准和实验原理

1、参考标准：GBT 8381.7-2009 饲料中喹乙醇的测定高效液相色谱仪法

2、原理：饲料试样中的喹乙醇经过甲醇水溶液提取， PLS固相萃取小柱净化，液相色谱C18色谱柱分离，紫外检测器分析。

二、仪器与试剂

全自动高通量柱膜通用固相萃取系统；二元高压梯度高效液相色谱仪；恒温振荡器；高速离心机；

甲醇（色谱纯FISHER Chemical）；盐酸（分析纯）；超纯水（实验室制备）。

三、实验过程

1、标准贮备液配置

用容量瓶准确配置喹乙醇标准贮备液为100ug/mL，选用甲醇定溶。

2、饲料样品处理

（1）提取

取5g饲料样品于具塞锥形瓶中，加入50mL5%甲醇水溶液，放入振荡器，恒温振荡45min，将提取液导入离心管，3500r/min离心10min，取上清液过0.45um滤膜过滤，等待全自动固相萃取仪净化。

（2）净化

SPE柱活化：临用前将3mL甲醇和3mL超纯水分别以3mL/min过柱，注意不要让萃取柱填料干涸；

上样：取5mL提取液上清液液过柱，流速不大于3mL/min；

淋洗：用3mL淋洗液淋洗小柱，3mL/min，氮气吹干10秒；

洗脱：用2mL40%甲醇水溶液以3mL/min洗脱并收集，氮气吹干60秒。

（3）样品加标处理

将提取样品的上清液，加标后样品浓度10ug/mL，用来测定全自动固相萃取系统加标回收率。

四、实验分析

1、液相色谱条件

色谱柱：Labtech C18（250×4.6 mm，5 μm）

流动相：甲醇 : 水=15 : 85

流速：1.0 mL/min

柱温：30 ℃

检测器：UV 260 nm

2、定量测定

将10ug/mL喹乙醇标准样品进液相色谱分析，查看色谱图，查看饲料样品提取液空白液相色谱分析图、饲料样品提取液加标浓度10ug/mL色谱图。

3、样品加标回收率结果

表1样品加标10ug/mL回收率

五、结论与讨论

本方法使用全自动高通量柱膜通用固相萃取系统净化饲料中喹乙醇回收率在90.9%~96.3%，RSD为2.0%。

结果比较理想，验证样品加标浓度在10ug/mL回收率可靠，实验可行，避免人工操作繁琐的问题。

注：本文仅代表个例，不具有普适性，仅作为方法探讨。

（内容参考仪器信息网）