高效液相色谱HPLC与超高效液相色谱UPLC在制药行业的应用

一、概述

近年来，国内制药行业发展日新月异，药品的分析检测需求也与日俱增。液相色谱​HPLC作为药物分析领域使用最广泛的技术手段，也被寄予了更高的期望。

而随着小粒径色谱柱的发展，越来越多的业内人士期望使用亚2μm粒径色谱柱的超高效液相色谱（UPLC）来拓宽选择性、提高工作效率、降低耗能、减少污染。

UPLC技术有着更高的分离度，更快的分析速度和更高的检测灵敏度，并已广泛应用在生命科学、医药化学、食品卫生等方面。

二、详细介绍

作为全球制药行业法规标杆，美国药典（USP）在制药行业拥有广泛的影响力。而在今年更新的最新版本USP中，收录了大量基于UPLC技术的各论（monograph），其中截止2016年年底将生效的品种高达57个。

这说明监管机构已经认可UPLC作为一个成熟的技术，可以被广泛应用于药物检测领域。

UPLC方法被大量收录于药典，说明企业在制定新药标准时，可以充分享受UPLC技术带来的优势。同时，由于HPLC方法之前已经被大量应用于药品检测，要提高效率，会存在如何转换以及转换后如何被监管机构认同的担忧。

对于此类担忧，USP通则<621>中规定：已有USP方法在由5μm粒径更换为亚2μm粒径方法时（柱化学一致），在保持色谱柱长度与粒径比值不减小的前提下，对进样量与流速相应修改后，可只对修改后的方法进行确认而无需进行全面验证。这为用户使用UPLC方法提供了法规上的依据。

针对这一热点问题，中国药典-沃特世联合实验室撰写了“超高效液相色谱与高效液相色谱方法转换及验证”文章，近期发表于《药物分析杂志》（2016年第7期）。文中阐述了HPLC方法向UPLC方法如何进行转换，以及转换后需要进行哪些关键的验证项目。

这一研究成果为企业和药检所进行方法转换提供了指导，促进UPLC技术的推广应用，从而实现提高药物分析效率及节能环保的目的。

中国药典-沃特世联合实验室进行了数种药物HPLC与UPLC方法的转换工作，流速和进样体积按前述公式计算，梯度洗脱程序按方法转换软件进行转换，并根据分离度和分析时间进行人工优化，简单方便。

转换后的方法灵敏度和分离度均有提高，分析时间大大缩短，溶剂消耗减少数倍。

实验室对转换后的方法进行了全面验证，结果除HPLC方法分离度略逊UPLC方法外，其他均一致，从实际案例证明了UPLC方法与HPLC方法转换的可行性。

（内容参考仪器信息网）